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Hogan Sneakers crescita assonale e la sinaptogenesi come

Hogan Sneakers

Nelle tecniche in vitro sono utilizzati sempre più allo schermo e caratterizzare neurotossica, ecc. In molti casi, danno chimico indotto a neuroni in via di sviluppo è stato esaminato in vitro valutando cambiamenti morfologici nella differenziazione e la crescita dei neuriti. Questa ricerca ha valutato l'uso di proteine ​​associate con la crescita assonale Hogan Sneakers e la sinaptogenesi come surrogati per la misurazione morfologica del differenziamento neuronale. Cellule PC12, che differenziano sul fattore di crescita nervoso stimolazione (NGF), sono stati utilizzati come modello in vitro. Indotto da NGF (50 ng / ml) differenziazione (cellule con almeno un neurite con una lunghezza pari al diametro del corpo cellulare) e la crescita dei neuriti (lunghezza più lunga neuriti) sono stati determinati mediante microscopia ottica ed analisi quantitativa immagine computerizzata. Differenziazione delle cellule PC12 e la crescita dei neuriti hanno raggiunto un plateau dopo 6 giorni di coltura. Espressione della crescita assonale associato proteina 43 (GAP-43) e la proteina Hogan 2014 Uomo Estate sinaptica sinapsina I sono stati valutati contemporaneamente da Western blot durante la differenziazione cellulare. L'espressione di GAP-43 era basso per la cultura Giorno 0 e aumentata gradualmente a livelli massimi per la cultura Giorno 5. Allo stesso modo, l'espressione synapsin ho aumentato lentamente nei giorni 0-4, e poi rapidamente nei giorni 5-7 della cultura. Inibitori farmacologici di segnalazione indotto da NGF sono stati usati per testare la sensibilità delle proteine ​​di interruzione chimica di differenziazione. L'inibitore della chinasi MAP, U0126 (5-30 micron) e l'inibitore della PKC, Bisindolylmaleimide I (Bis I; 1,25-5 micron) ha inibito la differenziazione e la crescita dei neuriti in modo concentrazione-dipendente. U0126 e Bis ho diminuito in modo significativo GAP-43, ma non ho synapsin espressione. È interessante notare che l'inibitore edelfosine PI-PLC (ET-18; 5-30 uM) stimolato differenziazione primi tempi di esposizione seguita da una diminuzione significativa della lunghezza dei neuriti in momenti successivi. Tuttavia, ET-18 non ha modificato l'espressione di GAP-43 o sinapsina I. Questi dati suggeriscono che GAP-43 può essere un utile indicatore dello stato di differenziazione delle cellule PC12.
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